Efecto inhibitorio de bacteriófagos líticos para la formación de biofilms de aislados clínicos de Pseudomonas aeruginosa Multirresistente bajo condiciones in vitro

Abstract

Los biofilms son comunidades sésiles que están compuestos de matriz de sustancia extracelular y producidos por ciertos patógenos como Pseudomonas aeruginosa que a su vez está generando resistencia a múltiples antimicrobianos; debido a ello, ocasiona un problema de gran envergadura en el ámbito de la salud intrahospitalaria. Objetivo: El presente estudio tiene como objetivo principal, evaluar el efecto inhibitorio de formación del biofilms bacteriano por parte de los bacteriófagos líticos de los aislados clínicos de P. aeruginosa Multirresistente (PAMR) en condiciones in vitro. Material y Métodos: Se realizó un estudio experimental in vitro, prospectivo y analítico, con cuatro aislados clínicos de PAMR (AO-506, AO-509, AO-520 y AO- 523) en el Laboratorio de Microbiología Molecular y Biotecnología - UPAO, proporcionados por el Hospital Belén de Trujillo; los cuales, se cultivaron en placas master y se realizaron overnight conforme el desarrollo del trabajo. Se determinó la formación de biofilms de dichos aislados clínicos a través del Método de Christensen modificado por el Laboratorio. Se realizó la titulación de bacteriófagos líticos por medio de diluciones. Por último, las bacterias se expusieron al bacteriófago lítico para valorar su efecto. Con relación al estudio de análisis estadístico, se realizó la prueba T de Student. Resultados: Tras exponer los aislados clínicos de PAMR formadoras de biofilms a los bacteriófagos líticos, se observó un mayor declive en las absorbancias del biofilms y se hallaron diferencias significativas estadísticamente respecto al grupo control. De todos los aislados clínicos, AO-506 demostró una disminución de formación del biofilms hasta un 28.47% a las 8 horas posterior a la aplicación de los bacteriófagos. Conclusión: Los bacteriófagos líticos tienen capacidad de inhibir la formación de biofilms bacterianos en condiciones in vitro. De este modo, este estudio permitirá emplear los bacteriófagos líticos como un potencial terapéutico en un futuro para el control de enfermedades causadas por bacterias resistentes a antimicrobianos

Biofilms are sessile communities composed of extracellular matrix and produced by certain pathogens such as Pseudomonas aeruginosa, which in turn is generating resistance to multiple antimicrobials; due to this, it causes a major problem in the field of intrahospital health. Objective: The main objective of this study is to evaluate the inhibitory effect of bacterial biofilms formation by lytic bacteriophages of clinical isolates of Multiresistant P. aeruginosa (MRPA) under in vitro conditions. Material and Methods: An experimental, prospective and analytical in vitro study was carried out with four clinical isolates of MDRPA (AO-506, AO-509, AO-520 and AO-523) in the Molecular Microbiology and Biotechnology Laboratory - UPAO, provided by the Belén de Trujillo Hospital; which were grown in master plates and were carried out overnight as the work progressed. Biofilms formation of these clinical isolates was determined using the Christensen method modified by the Laboratory. The titration of lytic bacteriophages was performed by means of dilutions. Finally, the bacteria were exposed to the lytic bacteriophage to assess its effect. Regarding the statistical analysis study, the Student T test was performed. Results: After exposing the clinical isolates of biofilms-forming PAMR to lytic bacteriophages, a greater decline in biofilms absorbance was observed and statistically significant differences were found with respect to the control group. Of all the clinical isolates, AO-506 demonstrated a decrease in biofilms formation up to 28.47% at 8 hours after the application of the bacteriophages. Conclusion: Lytic bacteriophages have the capacity to inhibit the formation of bacterial biofilms under in vitro conditions. This study will thus allow the use of lytic bacteriophages as a potential therapeutic in the future for the control of diseases caused by antimicrobial-resistant bacteria